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病毒在肿瘤研究中的应用

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发表于 2023-2-10 14:12:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
肿瘤研究简介
癌症细胞,又称癌干细胞、肿瘤干细胞,是指具有干细胞性质的癌细胞,也就是具有“自我复制”以及“具有多细胞分化”等能力。通常这类的细胞被认为有形成肿瘤,发展成癌症的潜力,特别是随着癌症转移出去后,产生新型癌症的来源。
“精准医学”时代肿瘤研究模式
1、基因信息挖掘



2、基因功能验证



3、机制探索



基因资源库和操作工具平台



针对肿瘤基因功能学研究,和元生物分子克隆服务平台可以提供:
1、包含15000个人类表达基因的快速构建和验证服务;
2、基因表达、RNAi、Talen、Cas9和基因突变在内的多种载体构建服务;
3、基因组编辑载体DNA切割活性验证服务;
4、结合慢病毒、腺病毒、腺相关病毒和逆转录病毒等多种病毒系统的载体应用。
病毒种类稳转株制备难转染细胞瘤内注射肿瘤干细胞
慢病毒
腺病毒××
腺相关病毒×××
逆转录病毒×
注:逆转录病毒可以特异性地感染肿瘤干细胞并稳定传代表达;由于逆转录病毒有较多操作系统,我们一般会根据客户应用推荐相应的系统用于实验。
RNA干扰与基因表达——基因功能研究的经典工具
常用基因表达及RNA干扰载体列表
载体名称载体种类应用方式
干扰pLenti-CMV-EGFP-U6-shRNA慢病毒绿色荧光标记感染细胞
pLenti-CMV-EGFP-U6-shRNA慢病毒绿色荧光标记,嘌呤霉素筛选
pAdeno-CMV-EGFP-U6-shRNA腺病毒绿色荧光标记
pAAV-CBG-EFGP-H1-shRNA腺相关病毒绿色荧光标记
表达pLenti-CMV-EGFP慢病毒绿色荧光标记感染细胞
pLenti-CMV-EGFP-PGK-Puro慢病毒绿色荧光标记,嘌呤霉素筛选
pLenti-TRE-EGFP-PGK-Puro慢病毒Tre诱导表达,嘌呤霉素筛选
pLenti-CMV-GFP-IRES-Puro-miRNA慢病毒microRNA表达
pAdeno-mCMV-EGFP-3Flag腺病毒腺病毒表达
pAAV-CMV-EGFP腺相关病毒绿色荧光标记
应用案例:



TALEN和CRISPR/Cas9基因操作工具



基因敲除及敲除技术原理比较
基因敲除及基因敲减在肿瘤方向研究中的应用方式比较
类别基本性质应用
切割酶序列识别方式基因突变表观遗传修饰转录调控转录后调控
Cas9外源表达gRNA-DNA
TALEN外源表达蛋白-DNA
RNAi外源表达RNA-RNAXXX

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