肿瘤免疫靶标 | SIRPα抗体联合疗法会是下一个研发热点吗？

花下风流花落花死花无常

SIRPα作为表达在巨噬细胞、骨髓细胞表面的跨膜蛋白，能够与其配体CD47蛋白结合，从而产生“别吃我”信号，阻止巨噬细胞吞噬健康的细胞。而癌细胞非常狡猾，同样也可以利用这一机制逃避巨噬细胞的吞噬。因此，开发CD47-SIRPα抗体药是目前肿瘤免疫治疗的一大热点。


图片来源：缔码生物团队
目前国内外产品布局CD47靶点的企业很多，但是靶向巨噬细胞表面的信号调节蛋白SIRPα却不多。CD47属于免疫球蛋白家族成员之一，广泛表达于多种肿瘤细胞，SIRPα是CD47的受体，肿瘤细胞可通过CD47-SIRPα信号通路逃逸巨噬细胞的免疫监视。因此，通过CD47抗体阻断CD47与SIRPα的结合可以激活巨噬细胞对肿瘤的吞噬作用。但是CD47在红细胞膜表面也有较高的表达， CD47治疗药物杀伤肿瘤细胞的同时，会误伤红细胞，导致出现贫血。同时，由于CD47的广泛表达，临床上抗体需要大剂量才会有效果，这是目前CD47临床开发上的俩大瓶颈。SIRPα则主要只存在于巨噬细胞和树突状性细胞表面，抑制SIRPα基本上不会引起红细胞贫血，同时，也不需要大量的抗体就能达到效果。


图片来源：参考文献[1]
围绕SIRPα抗体的研究代表文献有2017年发表在PNAS上的“Anti-SIRPα antibody immunotherapy enhances neutrophil and macrophage anti-tumor activity”，文章作者开发了一株抗SIRPα的鼠单克隆抗体KWAR23，该抗体可以阻断SIRPα与CD47的结合。而体内外实验均发现，KWAR23联合Rituximab、obinutuzumab或者其他抗CD20的抗体，均可以显著提高对Burkitt’s 淋巴瘤的吞噬效果。另外，KWAR23联合EGFR抗体 cetuximab和pantitumumab，也同样能够增强对不同结肠癌细胞系的吞噬。与CD70抗体vorsetuzumab制备成双特异性抗体使用，也同样可以显著抑制肿瘤的生长。但是，单独使用SIRPα抗体，并不能诱导巨噬细胞对肿瘤细胞的吞噬。类似的研究还有2020年发表在JCI insight的文章“Targeting macrophage checkpoint inhibitor SIRPα for anticancer therapy”，研究者开发的抗SIRPα人源化的单克隆抗体1H9，能够阻断SIRPα蛋白与CD47蛋白的互作，体内外实验证实1H9与其他治疗性抗体联合使用，具有协同增强的作用。因此，从已发表的文章来看，以 SIRPα为靶点开发联合用抗体或者双特异性抗体是未来肿瘤免疫疗法的一个方向。
缔码生物拥有成熟的哺乳动物细胞表达系统，我们表达的真核蛋白CD47和SIRPα通过ELISA、flow cytometry等证明具有良好的生物学活性。SIRPα蛋白免疫动物后，通过DimAb抗体制备平台，获得了数株具有中和竞争活性的兔重组单克隆抗体，我们选取了其中一株克隆DM8做了进一步的分析，其在THP-1细胞上和CD47蛋白的竞争中和效价IC50为30.88ng/ml。
Anti-SIRPα (DM8) 中和抗体数据
Anti-SIRPα(DM8)封闭CD47-SIRPα结合的活性验证实验


Figure 1. Competition assay demonstrating Anti-SIRPα DM8 can block CD47 binding to THP-1 cells. IC50=30.88ng/ml.
Anti-SIRPα(DM8)流式结合滴度检测实验


Figure 2.Flow cytometry data of serially titrated Anti-SIRPα (Clone: DM8). The Y-axis represents the mean fluorescence intensity (MFI) while the X-axis represents the concentration of IgG used.
未来，我们希望和对该靶点感兴趣的机构一起合作，继续深入开发以SIRPα为靶点的功能性抗体产品。目前Anti-SIRPα(DM8)克隆已上线，欢迎垂询和测试。

参考文献：
[1]Chao, Mark P., Irving L. Weissman, and Ravindra Majeti. "The CD47–SIRPα pathway in cancer immune evasion and potential therapeutic implications." Current opinion in immunology 24.2 (2012): 225-232.
[2]Ring, Nan Guo, et al. "Anti-SIRPα antibody immunotherapy enhances neutrophil and macrophage antitumor activity." Proceedings of the National Academy of Sciences 114.49 (2017): E10578-E10585.
[3]Liu, Jie, et al. "Targeting macrophage checkpoint inhibitor SIRPα for anticancer therapy." JCI insight 5.12 (2020).